本文目录导读:
液相色谱冲洗的步骤主要包括仪器冲洗和色谱柱冲洗两部分,以下是详细的步骤:
仪器冲洗方法
1、先使用纯水冲洗输液泵和进样针等部件,打开排液阀,将流动相调至最大流速冲洗,直到流动相流出清澈为止。
2、如果使用的是缓冲盐溶液,冲洗时间应适当延长,以确保仪器内部无结晶析出,缓冲盐析出结晶可能导致仪器管路堵塞或损坏泵头,更换流动相时也要进行清洗,避免不同流动相之间的交叉污染。
液相冲洗色谱柱的方法
色谱柱的清洗需要根据污染程度进行,轻微污染时,可以使用溶剂如甲醇或乙腈以较大流量进行冲洗;重度污染时,可能需要采用弱酸或弱碱进行清洗,清洗完成后使用纯水冲洗以去除酸碱残留,具体步骤如下:
1、使用纯水溶液进行冲洗,以去除色谱柱中的气泡和残留物,流速可以从低到高逐渐提高,有助于排出气泡和固体杂质。
2、如果色谱柱污染严重,可以使用有机溶剂如甲醇或乙腈进行清洗,注意使用合适的流速和清洗时间,以达到最佳清洗效果,清洗完成后再次使用纯水溶液进行冲洗。
3、若遇到难以去除的污染物,可以使用弱酸或弱碱溶液进行清洗,同样要注意控制流速和清洗时间,清洗完成后务必使用纯水进行多次冲洗,以去除酸碱残留。
液相色谱冲洗的目的是保持仪器和色谱柱的清洁与正常运行,在实际操作中,应根据具体情况选择合适的冲洗方法和步骤,以上内容仅供参考,如需更多信息,建议咨询色谱专业技术工程师或查阅相关文献。